Objetivo: El propósito de este estudio fue determinar la flora bacteriana ocular normal aislada de pacientes programados para cirugí­a de catarata y evaluar su susceptibilidad in vitro para ofloxacina, ciprofloxacina, lomefloxacina y moxifloxacina. Métodos: Durante Noviembre de 2007 a Febrero de 2008, se tomaron frotis conjuntivales provenientes de 148 ojos de 120 pacientes (60 mujeres y 60 hombres), los cuales fueron inoculados en placas de agar sangre al 5% y agar gelosa chocolate. La comparación de los perfiles de susceptibilidad in vitro y la concentración inhibitoria minima 50 (CIM50) de las bacterias Gram- positivas aisladas (n= 168) para ofloxacina y ciprofloxacina (fluoroquinolonas de segunda generación), lomefloxacina (fluoroquinolona de tercera generación) y moxifloxacina (fluoroquinolona de cuarta generación), fue realizada utilizando los datos obtenidos del sistema semiautomático MicroScan y del E-test. Resultados: Ciento sesenta y ocho microorganismos fueron aislados de 96 muestras provenientes de 148 ojos. Las especies aisladas fueron Gram-positivas (100%, 168 de los 168 aislados) y el organismo mas frecuentemente encontrado fue el Staphylococcus epidermidis, con un 61,91% (104 de los 168 aislados). Las otras bacterias gram-positivas aisladas fueron Staphylococcus aureus 33,33%(56), Staphylococcus saprofí­tico 2,38% (4) y Staphylococcus hominis 2,38% (4). La tasa de susceptibilidad in vitro a la ofloxacina, ciprofloxacina, lomefloxacina y moxifloxacina fue para Staphylococcus epidermidis 76,92% (80 de 104 aislados), 76,92% (80), 84,62% (88) y 92,31% (96), y para Staphylococcus aureus 100% (56 de 56 aislados), 100% (56), 100% (56), y 7,14% (4), respectivamente. Las medianas, las CIM50 y las modas de moxifloxacina fueron menores que aquellas de ciprofloxacina para ambas bacterias. Los estudios de potencia indicaron que la moxifloxacina fue estadí­sticamente más potente que la ciprofloxacina contra el Staphylococcus aureus (P < 0,0001). Conclusiones: Las fluoroquinolonas tienen actividad contra la flora bacteriana conjuntival normal de pacientes programados para cirugí­a de catarata. En nuestro estudio in vitro, la fluoroquinolona de cuarta generación (moxifloxacina) tuvo un amplio espectro de cobertura contra la flora ocular normal y mayor susceptibilidad que las fluoroquinolonas de segunda y tercera generación contra las bacterias gram-positivas aisladas, en especial el Staphylococcus aureus. Se requerirán estudios clí­nicos para confirmar estos resultados.